如何提取及测定海带中的叶绿素-全网最热门真人财神游戏

如何提取及测定海带中的叶绿素

海带是一种营养价值很高的蔬菜，由于海水可被利用的光能要比陆地上少得多，要完成能量的转换，必须增高参与光合作用的叶绿素的含量。所以，一般来说，海带中叶绿素和其他辅助色素的含量高于陆生植物。叶绿素依其结构不同可分为叶绿素a和叶绿素b，其基本结构都是镁结合的卟啉环。当前测定叶绿素的常规方法多为溶剂浸提-可见分光光度法，用超声波萃取分离出叶绿素，然后用氢离子置换出镁离子，再用原子吸收分光光度法测镁的量即可计算出海带中叶绿素的含量，以及专业的叶绿素测量仪法。这些方法都是叶绿素测定的最常用方法，我们在具体操作过程中，要按照不同的需求，进行合理的选择。

叶绿素提取方法：称取4g粉碎后的海带于烧杯中，加入30ml有机提取剂，用保鲜膜封口，室温200w超声波提取20min，过滤，收集滤液。移取8ml滤液于分液漏斗中，加入4ml的石油醚和等量饱和氯化钠溶液萃取，加12ml的超纯水洗涤有机相，重复萃取两次，洗去提取溶剂及无机态盐类，合并石油醚相。于石油醚相中加入0.9mol/l盐酸15ml反萃取15min，分取水相，用超纯水定容于50ml容量瓶中，用原子吸收分光光度计测定此溶液中镁的质量浓度。测定条件为空气-乙炔火焰，镁波长285.2nm，狭缝宽度0.2nm，灯电流3ma，燃烧器高度5.0mm。原子吸收法测定海带中叶绿素含量的计算，见式(1)。叶绿素含量/(mg/g)=[c×v1×899.3×v3]/v2×m×24×1000(1)。式中：c为由标准曲线得被测试液中镁的质量浓度/(μg/ml)；m为称样量/g；v1为混合提取液的总体积/ml；v2为移取石油醚相的体积/ml；v3为返萃水相的定容体积/ml；899.3为叶绿素a、叶绿素b的平均摩尔质量/(g/mol)；24为镁的摩尔质量/(g/mol)。

采用超声波提取法对海带中叶绿素进行提取，原子吸收光谱法对提取出的叶绿素中的镁离子进行测定，从而间接得出海带中叶绿素的含量。结果表明，超声波提取叶绿素的最佳工艺条件：以无水乙醇与丙酮体积比1:1的混合液为提取剂，按料液比2:15(g/ml)，在室温下超声波选择200w的功率提取2次，每次20min。反萃取的最佳测定工艺条件：用浓度为0.9mol/l的盐酸15ml进行反萃取15min。原子吸收法测定检出限为0.008μg/ml，海带中叶绿素的含量5.486mg/g，相对标准偏差0.675%，回收率97.7%。此方法表明：原子吸收光谱法受干扰程度小，且精密度、灵敏度和准确度较高。